UDG/UNG এনজাইম
ইউডিজি (ইউরাসিল ডিএনএ গ্লাইকোসিলেজ) ইউরাসিল বেস এবং ssDNA এবং dsDNA-তে সুগার-ফসফেট ব্যাকবোনের মধ্যে এন-গ্লাইকোসিডিক লিঙ্কের হাইড্রোলাইসিসকে অনুঘটক করতে পারে।এটি সহজেই এরোসল দূষণ নিয়ন্ত্রণ করতে পারে এবং সাধারণ আণবিক জীববিজ্ঞান ব্যবস্থা যেমন PCR, qPCR, RT-qPCR এবং LAMP এর জন্য উপযুক্ত।
স্পেসিফিকেশন
| এক্সপ্রেশন হোস্ট | রিকম্বিন্যান্ট ই. কোলি উইথ ইউরাসিল ডিএনএ গ্লাইকোসিলেজ জিন |
| আণবিক ভর | 24. 8kDa |
| বিশুদ্ধতা | ≥95% (SDS-পৃষ্ঠা) |
| তাপ নিষ্ক্রিয়করণ | 95℃, 5~10 মিনিট |
| ইউনিট সংজ্ঞা | এক ইউনিট (U)কে 25℃-এ 30 মিনিটের মধ্যে l μg dU-যুক্ত dsDNA-এর হাইড্রোলাইসিসকে অনুঘটক করার জন্য প্রয়োজনীয় এনজাইমের পরিমাণ হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়। |
স্টোরেজ
পণ্য দুটি বছরের জন্য -25℃~-15°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা উচিত।
নির্দেশনা
1.নিম্নলিখিত সিস্টেম অনুযায়ী পিসিআর প্রতিক্রিয়া মিশ্রণের প্রস্তুতি
| উপাদান | আয়তন (μL) | চূড়ান্ত ঘনত্ব |
| 10×PCR বাফার (Mg²+ প্লাস) | 5 | 1× |
| 25 mmol/LMgCl | 3 | 1.5 mmol/L |
| dUTP(10 mmol/L) | 3 | 0.6 mmol/L |
| dCTP/dGTP/dATP/dTTP(10mmol/Leach) | 1 | 0.2 মিমিওল/লিচ |
| টেমপ্লেট ডিএনএ | X | - |
| প্রাইমার 1 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| প্রাইমার 2 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| Taq DNA পলিমারেজ (5 U/μL) | 0. 5 | 0. 05 U/μL |
| ইউরাসিল ডিএনএ গ্লাইকোসিলেজ (UDG/UNG), 1 U/μL | 1 | 1 U/μL |
| ddH₂O | 50 পর্যন্ত | - |
বিঃদ্রঃ: পরীক্ষামূলক প্রয়োজনীয়তা অনুসারে, dUTP-এর চূড়ান্ত ঘনত্ব 0.2-0.6 mmol/L-এর মধ্যে সামঞ্জস্য করা যেতে পারে এবং 0.2 mmol/L dTTP বেছে বেছে যোগ করা যেতে পারে।
2.পরিবর্ধন পদ্ধতি
| সাইকেল ধাপ | তাপমাত্রা | সময় | চক্র |
| dU- ধারণকারী টেমপ্লেট অবক্ষয় | 25℃ | 10 মিনিট | 1 |
| UDG সক্রিয়করণ, টেমপ্লেট প্রাথমিক বিকৃতকরণ | 95℃ | 5~10 মিনিট | 1 |
| বিকৃতকরণ | 95℃ | 10 সেকেন্ড |
30-35 |
| অ্যানিলিং | 60℃ | 20 সেকেন্ড | |
| এক্সটেনশন | 72℃ | 30সেকেন্ড/কেবি | |
| চূড়ান্ত এক্সটেনশন | 72℃ | 5 মিনিট | 1 |
বিঃদ্রঃ: পরীক্ষামূলক প্রয়োজনীয়তা অনুসারে 25 ডিগ্রি সেলসিয়াসে প্রতিক্রিয়ার সময় 5-10 মিনিটের মধ্যে সামঞ্জস্য করা যেতে পারে।
মন্তব্য
1.ইউডিজি বেশিরভাগ পিসিআর প্রতিক্রিয়া বাফারগুলিতে সক্রিয়।
2.এনজাইমগুলি ব্যবহার করার সময় একটি বরফ বাক্সে বা বরফের স্নানে সংরক্ষণ করা উচিত এবং ব্যবহারের পরপরই -20°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা উচিত।
3.আপনার স্বাস্থ্য এবং নিরাপত্তা নিশ্চিত করতে অনুগ্রহ করে প্রয়োজনীয় পিপিই, যেমন ল্যাব কোট এবং গ্লাভস পরিধান করুন!
