ইউনিভার্সাল SYBR সবুজ qPCR প্রিমিক্স (নীল)

বিড়াল নম্বর: HCB5041B

ইউনিভার্সাল ব্লু কিউপিসিআর মাস্টার মিক্স (ডাই ভিত্তিক) হল 2×রিয়েল-টাইম পরিমাণগত পিসিআর পরিবর্ধনের জন্য একটি প্রাক-সমাধান যা উচ্চ সংবেদনশীলতা এবং নির্দিষ্টতা দ্বারা চিহ্নিত, নীল রঙের, এবং নমুনা সংযোজন ট্রেসিংয়ের প্রভাব রয়েছে।মূল উপাদান Taq DNA পলিমারেজ নমুনা তৈরির সময় প্রাইমার অ্যানিলিংয়ের কারণে অ-নির্দিষ্ট পরিবর্ধনকে কার্যকরভাবে বাধা দিতে অ্যান্টিবডি হট স্টার্ট ব্যবহার করে।একই সময়ে, সূত্রটি PCR প্রতিক্রিয়ার পরিবর্ধন দক্ষতা উন্নত করতে এবং বিভিন্ন GC বিষয়বস্তুর (30 ~ 70%) সাথে জিনের পরিবর্ধনকে সমান করতে প্রচারকারী কারণগুলিকে যুক্ত করে, যাতে পরিমাণগত PCR একটি বিস্তৃত পরিমাণে একটি ভাল রৈখিক সম্পর্ক অর্জন করতে পারে। অঞ্চল.এই পণ্যটিতে বিশেষ ROX প্যাসিভ রেফারেন্স ডাই রয়েছে, যা বেশিরভাগ qPCR যন্ত্রের জন্য প্রযোজ্য।বিভিন্ন যন্ত্রে ROX এর ঘনত্ব সামঞ্জস্য করার প্রয়োজন নেই।প্রশস্তকরণের জন্য প্রতিক্রিয়া সিস্টেম প্রস্তুত করার জন্য শুধুমাত্র প্রাইমার এবং টেমপ্লেট যোগ করা প্রয়োজন।

উপাদান

ইউনিভার্সাল ব্লু qPCR মাস্টার মিক্স

জমা শর্ত

পণ্যটি আইস প্যাকের সাথে পাঠানো হয় এবং 18 মাসের জন্য -25℃~-15℃ এ সংরক্ষণ করা যেতে পারে।প্রতিক্রিয়া সিস্টেম সংরক্ষণ বা প্রস্তুত করার সময় শক্তিশালী আলো বিকিরণ এড়ানো প্রয়োজন।

স্পেসিফিকেশন

নির্দেশনা

1. প্রতিক্রিয়া সিস্টেম

[দ্রষ্টব্য]: প্রবল ঝাঁকুনি থেকে অতিরিক্ত বুদবুদ এড়াতে ব্যবহারের আগে পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করুন।

ক) প্রাইমারের ঘনত্ব: চূড়ান্ত প্রাইমারের ঘনত্ব হল 0.2μmol/L, এবং উপযুক্ত হিসাবে 0.1 এবং 1.0μmol/L এর মধ্যেও সামঞ্জস্য করা যেতে পারে।

খ) টেমপ্লেটের ঘনত্ব: যদি টেমপ্লেটটি সিডিএনএ স্টক দ্রবণে অপ্রস্তুত হয়, তাহলে ব্যবহৃত আয়তন qPCR বিক্রিয়ার মোট আয়তনের 1/10 এর বেশি হওয়া উচিত নয়।

গ) টেমপ্লেট পাতলা করা: সিডিএনএ স্টক দ্রবণটি 5-10 বার পাতলা করার পরামর্শ দেওয়া হয়।পরিবর্ধন দ্বারা প্রাপ্ত Ct মান 20-30 চক্র হলে টেমপ্লেটের সর্বোত্তম পরিমাণ যোগ করা ভাল।

ঘ) প্রতিক্রিয়া সিস্টেম: লক্ষ্য জিন পরিবর্ধনের কার্যকারিতা এবং পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা নিশ্চিত করতে 20μL বা 50μL ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়।

e) সিস্টেম প্রস্তুতি: অনুগ্রহ করে সুপার ক্লিন বেঞ্চে প্রস্তুত করুন এবং নিউক্লিজ অবশিষ্টাংশ ছাড়া টিপস এবং প্রতিক্রিয়া টিউবগুলি ব্যবহার করুন;এটি ফিল্টার কার্তুজ সঙ্গে টিপস ব্যবহার করার সুপারিশ করা হয়.ক্রস দূষণ এবং এরোসল দূষণ এড়িয়ে চলুন।

2.প্রতিক্রিয়া প্রোগ্রাম

স্ট্যান্ডার্ড প্রোগ্রাম

দ্রুত প্রোগ্রাম

[দ্রষ্টব্য]: দ্রুত প্রোগ্রামটি বেশিরভাগ জিনের জন্য উপযুক্ত, এবং পৃথক জটিল সেকেন্ডারি স্ট্রাকচার জিনের জন্য স্ট্যান্ডার্ড প্রোগ্রামগুলি চেষ্টা করা যেতে পারে।

ক) অ্যানিলিং তাপমাত্রা এবং সময়: অনুগ্রহ করে প্রাইমার এবং টার্গেট জিনের দৈর্ঘ্য অনুযায়ী সামঞ্জস্য করুন।

b) ফ্লুরোসেন্স সিগন্যাল অধিগ্রহণ (★): অনুগ্রহ করে যন্ত্র ব্যবহারের নির্দেশাবলীতে প্রয়োজনীয়তা অনুযায়ী পরীক্ষামূলক পদ্ধতি সেট করুন।

গ) গলানো বক্ররেখা: যন্ত্রের ডিফল্ট প্রোগ্রাম সাধারণত ব্যবহার করা যেতে পারে।

3. ফলাফল বিশ্লেষণ 

পরিমাণগত পরীক্ষার জন্য ন্যূনতম তিনটি জৈবিক প্রতিলিপি প্রয়োজন ছিল।প্রতিক্রিয়ার পরে, পরিবর্ধন বক্ররেখা এবং গলে যাওয়া বক্ররেখা নিশ্চিত করতে হবে।

3.1 পরিবর্ধন বক্ররেখা:

আদর্শ পরিবর্ধন বক্ররেখা S-আকৃতির।পরিমাণগত বিশ্লেষণ সবচেয়ে সঠিক হয় যখন Ct মান 20 এবং 30-এর মধ্যে পড়ে। যদি Ct মান 10-এর কম হয়, তাহলে টেমপ্লেটটি পাতলা করে আবার পরীক্ষা করা প্রয়োজন।যখন Ct মান 30-35 এর মধ্যে হয়, তখন টেমপ্লেট ঘনত্ব বা প্রতিক্রিয়া সিস্টেমের আয়তন বৃদ্ধি করা প্রয়োজন, যাতে পরিবর্ধন দক্ষতা উন্নত করা যায় এবং ফলাফল বিশ্লেষণের যথার্থতা নিশ্চিত করা যায়।যখন Ct মান 35-এর বেশি হয়, পরীক্ষার ফলাফলগুলি জিনের অভিব্যক্তি পরিমাণগতভাবে বিশ্লেষণ করতে পারে না, তবে গুণগত বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।

3.2 গলানো বক্ররেখা:

গলে যাওয়া বক্ররেখার একক শিখর নির্দেশ করে যে প্রতিক্রিয়ার নির্দিষ্টতা ভাল এবং পরিমাণগত বিশ্লেষণ করা যেতে পারে;যদি গলে যাওয়া বক্ররেখা দ্বিগুণ বা একাধিক শিখর দেখায় তবে পরিমাণগত বিশ্লেষণ করা যাবে না।গলে যাওয়া বক্ররেখাটি দ্বিগুণ শিখর দেখায় এবং অ-লক্ষ্যের শিখরটি প্রাইমার ডাইমার বা ডিএনএ অ্যাগারোজ জেল ইলেক্ট্রোফোরেসিস দ্বারা অ-নির্দিষ্ট পরিবর্ধন কিনা তা বিচার করা প্রয়োজন।এটি একটি প্রাইমার ডাইমার হলে, প্রাইমারের ঘনত্ব কমাতে বা উচ্চ পরিবর্ধন দক্ষতা সহ প্রাইমারগুলিকে পুনরায় ডিজাইন করার পরামর্শ দেওয়া হয়।যদি এটি অ-নির্দিষ্ট পরিবর্ধন হয়, অনুগ্রহ করে অ্যানিলিং তাপমাত্রা বাড়ান, বা প্রাইমারগুলিকে নির্দিষ্টতার সাথে পুনরায় ডিজাইন করুন।

মন্তব্য

আপনার স্বাস্থ্য এবং নিরাপত্তা নিশ্চিত করতে অনুগ্রহ করে প্রয়োজনীয় পিপিই, যেমন ল্যাব কোট এবং গ্লাভস পরিধান করুন！

এই পণ্য শুধুমাত্র গবেষণা ব্যবহারের জন্য!