ভাইরাল ডিএনএ/আরএনএ এক্সট্রাকশন কিট
এই কিটটি নমুনা থেকে উচ্চ-বিশুদ্ধতা ভাইরাল ডিএনএ/আরএনএ দ্রুত নিষ্কাশনের জন্য উপযুক্ত যেমন নাসোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াবস, এনভায়রনমেন্টাল সোয়াবস, সেল কালচার সুপারন্যাট্যান্টস এবং টিস্যু হোমোজেনেট সুপারন্যাট্যান্টস।কিটটি সিলিকা মেমব্রেন বিশুদ্ধকরণ প্রযুক্তির উপর ভিত্তি করে তৈরি যা উচ্চ মানের ভাইরাল ডিএনএ/আরএনএ নিষ্কাশনের জন্য ফেনল/ক্লোরোফর্ম জৈব দ্রাবক বা সময়-সাপেক্ষ অ্যালকোহল বৃষ্টিপাত ব্যবহার করার প্রয়োজনীয়তা দূর করে।প্রাপ্ত নিউক্লিক অ্যাসিডগুলি অমেধ্যমুক্ত এবং ডাউনস্ট্রিম পরীক্ষায় ব্যবহারের জন্য প্রস্তুত যেমন রিভার্স ট্রান্সক্রিপশন, পিসিআর, আরটি-পিসিআর, রিয়েল-টাইম পিসিআর, নেক্সট-জেনারেশন সিকোয়েন্সিং (এনজিএস), এবং নর্দান ব্লট।
জমা শর্ত
15 ~ 25 ℃ এ সঞ্চয় করুন এবং ঘরের তাপমাত্রায় পরিবহন করুন
উপাদান
উপাদান | 100RXNS |
বাফার ভিএল | 50 মিলি |
বাফার RW | 120 মিলি |
RNase-মুক্ত ddH2 O | 6 মিলি |
ফাস্ট পিউর আরএনএ কলাম | 100 |
সংগ্রহ টিউব (2ml) | 100 |
RNase-মুক্ত কালেকশন টিউব (1.5ml) | 100 |
বাফার ভিএল:lysis এবং বাঁধাই জন্য একটি পরিবেশ প্রদান.
বাফার RW:অবশিষ্ট প্রোটিন এবং অন্যান্য অমেধ্য অপসারণ.
RNase-মুক্ত ddH2O:স্পিন কলামে ঝিল্লি থেকে এল্যুট ডিএনএ/আরএনএ।
ফাস্ট পিউর আরএনএ কলাম:বিশেষ করে DNA/RNA শোষণ করে।
সংগ্রহ টিউব 2 মিলি:পরিশোধন সংগ্রহ করুন।
RNase-মুক্ত সংগ্রহ টিউব 1.5 মিলি:DNA/RNA সংগ্রহ করুন।
অ্যাপ্লিকেশন
নাসোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াবস, এনভায়রনমেন্টাল সোয়াবস, সেল কালচার সুপারন্যাট্যান্টস এবং টিস্যু হোমোজেনেট সুপারন্যাট্যান্ট।
স্ব-প্রস্তুত মেটারials
RNase-মুক্ত পাইপেট টিপস, 1.5 মিলি RNase-মুক্ত সেন্ট্রিফিউজ টিউব, সেন্ট্রিফিউজ, ঘূর্ণি মিক্সার, এবং পাইপেট।
পরীক্ষা প্রক্রিয়া
একটি বায়োসেফটি ক্যাবিনেটে নিম্নলিখিত সমস্ত পদক্ষেপগুলি সম্পাদন করুন৷
1. একটি RNase-মুক্ত সেন্ট্রিফিউজ টিউবে 200 μl নমুনা যোগ করুন (অপর্যাপ্ত নমুনার ক্ষেত্রে PBS বা 0.9% NaCl দিয়ে তৈরি করুন), 500 μl বাফার VL যোগ করুন, 15 - 30 সেকেন্ডের জন্য ঘূর্ণি দিয়ে ভালভাবে মিশ্রিত করুন এবং সেন্ট্রিফিউজ করুন সংক্ষেপে টিউবের নীচে মিশ্রণটি সংগ্রহ করতে।
2. একটি সংগ্রহের টিউবে 2 মিলি ফাস্টপিউর আরএনএ কলাম রাখুন।মিশ্রণটি ধাপ 1 থেকে ফাস্টপিউর আরএনএ কলামে স্থানান্তর করুন, 1 মিনিটের জন্য 12,000 rpm (13,400 × g) এ সেন্ট্রিফিউজ করুন এবং ফিল্টারটি বাতিল করুন।
3. ফাস্টপিউর আরএনএ কলামে 600 μl বাফার RW যোগ করুন, 30 সেকেন্ডের জন্য 12,000 rpm (13,400 × g) এ সেন্ট্রিফিউজ করুন এবং পরিস্রুতটি বাতিল করুন।
4. ধাপ 3 পুনরাবৃত্তি করুন।
5. খালি কলামটিকে 2 মিনিটের জন্য 12,000 rpm (13,400 × g) এ সেন্ট্রিফিউজ করুন।
6. FastPure RNA কলামগুলিকে একটি নতুন RNase-মুক্ত কালেকশন টিউবে 1.5 মিলি (কিটে দেওয়া) সাবধানে স্থানান্তর করুন এবং কলাম স্পর্শ না করে ঝিল্লির কেন্দ্রে 30 - 50 μl RNase-মুক্ত ddH2O যোগ করুন।ঘরের তাপমাত্রায় 1 মিনিটের জন্য দাঁড়াতে দিন এবং 12,000 rpm (13,400 × g) 1 মিনিটের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন।
7. ফাস্ট পিউর আরএনএ কলাম বাতিল করুন।ডিএনএ/আরএনএ সরাসরি পরবর্তী পরীক্ষা-নিরীক্ষার জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে, অথবা অল্প সময়ের জন্য -30~ -15°C তাপমাত্রায় বা দীর্ঘ সময়ের জন্য -85~-65°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা যেতে পারে।
মন্তব্য
শুধুমাত্র গবেষণা ব্যবহারের জন্য।ডায়াগনস্টিক পদ্ধতিতে ব্যবহারের জন্য নয়।
1. নমুনাগুলিকে আগে থেকেই ঘরের তাপমাত্রায় সামঞ্জস্য করুন।
2. ভাইরাস অত্যন্ত সংক্রামক।পরীক্ষা করার আগে সমস্ত প্রয়োজনীয় নিরাপত্তা সতর্কতা নেওয়া হয়েছে তা নিশ্চিত করুন।
3. নমুনা বারবার জমাট বাঁধা এবং গলানো এড়িয়ে চলুন, কারণ এটি নিষ্কাশিত ভাইরাল ডিএনএ/আরএনএ-এর ক্ষয় বা ফলন হ্রাস করতে পারে।
4. স্ব-প্রস্তুত সরঞ্জামের মধ্যে রয়েছে RNase-মুক্ত পাইপেট টিপস, 1.5 মিলি RNase-মুক্ত সেন্ট্রিফিউজ টিউব, সেন্ট্রিফিউজ, ঘূর্ণি মিক্সার এবং পাইপেট।
5. কিট ব্যবহার করার সময়, একটি ল্যাব কোট, ডিসপোজেবল ল্যাটেক্স গ্লাভস এবং একটি ডিসপোজেবল মাস্ক পরুন এবং RNase দূষণের ঝুঁকি কমাতে RNase-মুক্ত ভোগ্যপণ্য ব্যবহার করুন।
6. অন্যথায় নির্দিষ্ট না হলে ঘরের তাপমাত্রায় সমস্ত পদক্ষেপগুলি সম্পাদন করুন৷
প্রক্রিয়া এবং কর্মপ্রবাহ