ওয়ান স্টেপ ফাস্ট RT-qPCR প্রোব প্রিমিক্স-ইউএনজি
বিড়াল নম্বর: HCR5143A
ওয়ান স্টেপ RT-qPCR প্রোব কিট (ফর ফাস্ট) হল একটি প্রোব-ভিত্তিক RT-qPCR ফাস্ট ডিটেকশন কিট যা সিঙ্গেল-প্লেক্স বা মাল্টিপ্লেক্স কোয়ান্টিটেটিভ পিসিআর-এর জন্য উপযুক্ত RNA কে টেমপ্লেট হিসাবে ব্যবহার করে (যেমন RNA ভাইরাস)।এই পণ্যটি একটি নতুন প্রজন্মের অ্যান্টিবডি-সংশোধিত Taq DNA পলিমারেজ এবং এক-ধাপে ডেডিকেটেড রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেজ ব্যবহার করে, দ্রুত পরিবর্ধনের জন্য একটি অপ্টিমাইজড বাফার সহ, যার দ্রুত পরিবর্ধন গতি, উচ্চতর পরিবর্ধন দক্ষতা এবং নির্দিষ্টতা রয়েছে।এটি অল্প সময়ের মধ্যে কম এবং উচ্চ ঘনত্বের নমুনার একক-প্লেক্স এবং মাল্টিপ্লেক্স উভয় ক্ষেত্রেই সুষম পরিবর্ধন সমর্থন করে।
উপাদান
1. 5×RT-qPCR বাফার (U+)
2. এনজাইম মিশ্রণ (U+)
মন্তব্য:
ক5×RT-qPCR বাফার (U+) dNTP এবং Mg অন্তর্ভুক্ত করে2+;
খ.এনজাইম মিক্স (U+) এর মধ্যে রয়েছে রিভার্স ট্রান্সক্রিপ্টেজ, হট স্টার্ট টাক ডিএনএ পলিমারেজ, RNase ইনহিবিটর এবং UDG;
গ.RNase-মুক্ত টিপস, EP টিউব ইত্যাদি ব্যবহার করুন।
ব্যবহারের আগে, 5×RT-qPCR বাফার (U+) ভালোভাবে মিশিয়ে নিন।গলানোর পরে যদি কোন বৃষ্টিপাত হয়, বাফারটি ঘরের তাপমাত্রায় ফিরে আসার জন্য অপেক্ষা করুন, মিশ্রিত করুন এবং দ্রবীভূত করুন এবং তারপরে সেগুলি স্বাভাবিকভাবে ব্যবহার করুন।
জমা শর্ত
পণ্যটি শুকনো বরফ দিয়ে পাঠানো হয় এবং 1 বছরের জন্য -25~-15℃ এ সংরক্ষণ করা যেতে পারে।
নির্দেশনা
1. প্রতিক্রিয়া পদ্ধতি
| উপাদান | আয়তন (20 μL প্রতিক্রিয়া) |
| 2 ×RT-qPCR বাফার | 4μL |
| এনজাইম মিশ্রণ (U+) | 0.8μL |
| প্রাইমার ফরওয়ার্ড | 0.1~ 1.0μM |
| প্রাইমার রিভার্স | 0.1~ 1.0μM |
| তাকমান প্রোব | 0.05~0.25μM |
| টেমপ্লেট | X μL |
| RNase-মুক্ত জল | 25μL পর্যন্ত |
দ্রষ্টব্য: প্রতিক্রিয়ার পরিমাণ হল 10-50μL।
2. সাইক্লিং প্রোটোকল (এসটেন্ডার)
| সাইকেল পদক্ষেপ | টেম্প | সময় | চক্র |
| বিপরীত প্রতিলিপি | 55 ℃ | 10 মিনিট | 1 |
| প্রাথমিক বিকৃতকরণ | 95 ℃ | 30 সেকেন্ড | 1 |
| বিকৃতকরণ | 95 ℃ | 10 সেকেন্ড | 45 |
| অ্যানিলিং/এক্সটেনশন | 60 ℃ | 30 সেকেন্ড |
| সাইক্লিং প্রোটোকল (দ্রুত) সাইকেল পদক্ষেপ |
টেম্প |
সময় |
চক্র |
| বিপরীত প্রতিলিপি | 55 ℃ | 5 মিনিট | 1 |
| প্রাথমিক বিকৃতকরণ | 95 ℃ | 5 সে | 1 |
| বিকৃতকরণ | 95 ℃ | 3 সে | 43 |
| অ্যানিলিং/এক্সটেনশন | 60 ℃ | 10 সে |
মন্তব্য:
কবিপরীত ট্রান্সক্রিপশন তাপমাত্রা 50℃ থেকে 60℃ এর মধ্যে, তাপমাত্রা বৃদ্ধি জটিল কাঠামো এবং উচ্চ CG বিষয়বস্তু টেমপ্লেটকে প্রশস্ত করতে সাহায্য করে;
খ.প্রাইমারের টিএম মানের উপর ভিত্তি করে সর্বোত্তম অ্যানিলিং তাপমাত্রা সামঞ্জস্য করা প্রয়োজন এবং রিয়েল টাইম পিসিআর যন্ত্রের উপর ভিত্তি করে ফ্লুরোসেন্স সংকেত সংগ্রহের জন্য সবচেয়ে কম সময় নির্বাচন করুন।
মন্তব্য
আপনার স্বাস্থ্য এবং নিরাপত্তা নিশ্চিত করতে অনুগ্রহ করে প্রয়োজনীয় পিপিই, যেমন ল্যাব কোট এবং গ্লাভস পরিধান করুন!
