RT-LAMP কালারমেট্রিক মাস্টার মিক্স HCB5204A
এই পণ্যটিতে প্রতিক্রিয়া বাফার, RT-এনজাইম মিক্স (Bst DNA পলিমারেজ এবং তাপ-প্রতিরোধী বিপরীত ট্রান্সক্রিপ্টেস), লাইওফিলাইজড প্রোটেক্ট্যান্ট এবং ক্রোমোজেনিক ডাই উপাদান রয়েছে।ব্যবহার করতে, শুধু বাফার ব্যবহার করুন, প্রতিক্রিয়া এনজাইম এবং প্রাইমার মিশ্রিত হয় এবং টেমপ্লেটে যোগ করা হয়;lyophilized সুরক্ষা যোগ করা সোজা হতে পারে.এটি একটি লাইওফিলাইজারের সাথে সংযুক্ত ছিল এবং লাইওফিলাইজড ছিল এবং ব্যবহার করার সময় শুধুমাত্র প্রাইমার এবং টেমপ্লেট যোগ করা হয়েছিল।এই কিটটি প্রশস্তকরণের একটি দ্রুত, স্পষ্ট চাক্ষুষ সনাক্তকরণ প্রদান করে, যা নেতিবাচক প্রতিক্রিয়া লাল রঙে নির্দেশিত হয় এবং ইতিবাচক প্রতিক্রিয়া হলুদে পরিবর্তন দ্বারা নির্দেশিত হয়।
উপাদান
উপাদান | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
লুপ-মিডিয়াটেড অ্যামপ্লিফিকেশন বাফার (রঞ্জক সহ) | 0.96 মিলি | 4.80 mL×2 | 9.60 mL×10 |
RT-এনজাইম মিক্স | 270 μL | 2.70 মিলি | 2.70 মিলি × 10 |
Lyophilized রক্ষাকারী | 0.96 mL×2 | 9.60 mL×2 | 9.60 mL×20 |
অ্যাপ্লিকেশন
ডিএনএ বা আরএনএ আইসোথার্মাল অ্যামপ্লিফিকেশনের জন্য।
জমা শর্ত
শুকনো বরফ দিয়ে পরিবহন করা হয়, -25~ -15℃ এ সংরক্ষণ করা হয়।ঘন ঘন ফ্রিজ-থাও এড়িয়ে চলুন, পণ্যটি 12 মাসের জন্য বৈধ।
প্রোটোকল
1.ঘরের তাপমাত্রায় ব্যবহার করার জন্য প্রতিক্রিয়া বাফারটি গলা দিন।ঘূর্ণি সংক্ষেপে বা টিউবগুলিকে পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মেশানোর জন্য বেশ কয়েকবার উল্টে দিন, তারপর টিউবের নীচে তরল সংগ্রহ করতে সেন্ট্রিফিউজ করুন।
2.প্রতিক্রিয়া সিস্টেমের প্রস্তুতি।এই বিকারকটি দুটি বিক্রিয়া পদ্ধতিতে প্রস্তুত করা যেতে পারে, তরল প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ এবং লাইওফিলাইজড সিস্টেম মিশ্রণ।
1) তরল প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ প্রস্তুত
উপাদান | আয়তন |
লুপ-মিডিয়াটেড অ্যামপ্লিফিকেশন বাফার (রঞ্জক সহ) | 10 μL |
RT-এনজাইম মিক্স | 2.8 μL |
10 × প্রাইমার মিক্সa | 5 μL |
টেমপ্লেট DNA/RNA b | × μL |
নিউক্লিয়াস-মুক্ত জল | 50 μL পর্যন্ত |
2) Lyophilization সিস্টেম মিশ্রণ
① লাইওফিলাইজড মিশ্রণ প্রস্তুত করুন
উপাদান | আয়তন |
লুপ-মিডিয়াটেড অ্যামপ্লিফিকেশন বাফার (রঞ্জক সহ) | 10 μL |
Lyophilized রক্ষাকারী | 20 μL |
RT-এনজাইম মিক্স | 2.8 μL |
নিউক্লিয়াস-মুক্ত জল | 50 μL পর্যন্ত |
② Lyophilization: প্রস্তুত মিশ্রণ একটি 50μL সিস্টেমে lyophilized ছিল
③ প্রতিক্রিয়া মিশ্রণ প্রস্তুত করুন
উপাদান | আয়তন |
Lyophilized মিশ্রণ | 1 টুকরা |
10 × প্রাইমার মিক্সa | 5 μL |
টেমপ্লেট DNA/RNA b | × μL |
নিউক্লিয়াস-মুক্ত জল | 50 μL পর্যন্ত |
মন্তব্য:
1) ক.10×প্রাইমার মিক্স: 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM লুপ F/B;
2) খ.DEPC (জলে দ্রবণীয়) নিউক্লিক অ্যাসিড টেম্পলের জন্য সুপারিশ করা হয়।
1.30-45 মিনিটের জন্য 65 ডিগ্রি সেলসিয়াসে ইনকিউবেট করুন, যা রঙ পরিবর্তনের প্রতিক্রিয়া সময় অনুযায়ী যথাযথভাবে বাড়ানো যেতে পারে।
2.খালি চোখের মতে, হলুদ ছিল ইতিবাচক এবং লাল নেতিবাচক।
মন্তব্য
1.লবণ বাফার টিউবের নীচে প্রদর্শিত হতে পারে, সংক্ষিপ্তভাবে ঘূর্ণি হতে পারে বা ঘরের তাপমাত্রায় পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মেশানোর জন্য টিউবগুলিকে কয়েকবার উল্টাতে পারে।
2.প্রতিক্রিয়া তাপমাত্রা প্রাইমারের অবস্থা অনুযায়ী 62 ℃ এবং 68 ℃ মধ্যে অপ্টিমাইজ করা যেতে পারে।
3.প্যাকেজযুক্ত রিএজেন্টগুলি দীর্ঘ সময়ের জন্য বাতাসের সংস্পর্শে আসা উচিত নয়।
4.লাল এবং হলুদ বিবর্ণ প্রতিক্রিয়া প্রতিক্রিয়া সিস্টেমের pH পরিবর্তনের উপর নির্ভর করে, দয়া করে ট্রাইস নিউক্লিক অ্যাসিড স্টোরেজ দ্রবণ ব্যবহার করবেন না, ডিডিএইচ ব্যবহার করার জন্য সুপারিশ করা হয়েছে2হে সঞ্চিত নিউক্লিক অ্যাসিড;
5.প্রতিক্রিয়া পদ্ধতির প্রস্তুতি, লাইওফিলাইজেশন, এবং নমুনা প্রক্রিয়াকরণ এবং নমুনা যোগ করার প্রক্রিয়া সহ পরীক্ষাটি মানসম্মত হওয়া উচিত;
6.দূষণ এড়াতে, মিথ্যা ইতিবাচক হস্তক্ষেপ এড়াতে ঘরের ফিউম হুডে টেমপ্লেট যুক্ত করুন, একটি অতি-পরিচ্ছন্ন বেঞ্চে প্রতিক্রিয়া ব্যবস্থা প্রস্তুত করার পরামর্শ দেওয়া হয়।