রনেস এ
Ribonuclease A (RNaseA) হল একটি একক-স্ট্রেন্ডেড পলিপেপটাইড যাতে প্রায় 13.7 kDa এর আণবিক ওজন সহ 4টি ডিসালফাইড বন্ড থাকে।RNase A হল একটি endoribonuclease যা বিশেষভাবে C এবং U অবশিষ্টাংশে একক-স্ট্রেন্ডেড RNA ক্ষয় করে।বিশেষত, ক্লিভেজ একটি নিউক্লিওটাইডের 5′-রাইবোজ এবং সংলগ্ন পাইরিমিডিন নিউক্লিওটাইডের 3′-রাইবোসে ফসফেট গ্রুপের দ্বারা গঠিত ফসফোডিস্টার বন্ধনকে স্বীকৃতি দেয়, যাতে 2, 3′-সাইক্লিক ফসফোলাইজডিং 3′-সাইক্লিক ফসফোসফেটগুলিকে চিহ্নিত করে। ′নিউক্লিওসাইড ফসফেটস (যেমন pG-pG-pC-pA-pG পিজি-পিজি-পিসিপি এবং এ-পিজি তৈরি করতে RNase A দ্বারা ক্লিভ করা হয়)।RNase A একক-স্ট্র্যান্ডেড RNA ক্লিভ করার জন্য সবচেয়ে সক্রিয়।প্রস্তাবিত কাজের ঘনত্ব হল 1-100μG/mL, বিভিন্ন প্রতিক্রিয়া সিস্টেমের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।কম লবণের ঘনত্ব (0-100 mM NaCl) একক-স্ট্রেন্ডেড RNA, ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড RNA, এবং RNA-DNA সংকরকরণের মাধ্যমে গঠিত RNA চেইন কাটতে ব্যবহার করা যেতে পারে।যাইহোক, উচ্চ লবণের ঘনত্বে (≥0.3 M), RNase A শুধুমাত্র বিশেষভাবে একক-স্ট্র্যান্ডেড RNA ক্লিভ করে।
প্লাজমিড ডিএনএ বা জিনোমিক ডিএনএ তৈরির সময় আরএনএ অপসারণ করতে RNase A সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত হয়। প্রস্তুতি প্রক্রিয়া চলাকালীন DNase সক্রিয় থাকুক বা না থাকুক তা সহজেই প্রতিক্রিয়াকে প্রভাবিত করতে পারে।একটি জল স্নান মধ্যে ফুটন্ত ঐতিহ্যগত পদ্ধতি DNase কার্যকলাপ নিষ্ক্রিয় করতে ব্যবহার করা যেতে পারে.এই পণ্যটিতে DNase এবং প্রোটিজ নেই এবং ব্যবহারের আগে তাপ চিকিত্সার প্রয়োজন হয় না।উপরন্তু, এই পণ্যটি RNase সুরক্ষা বিশ্লেষণ এবং RNA ক্রম বিশ্লেষণের মতো আণবিক জীববিজ্ঞান পরীক্ষায়ও ব্যবহার করা যেতে পারে।
জমা শর্ত
পণ্যটি -25～-15℃ এ সংরক্ষণ করা যেতে পারে, 2 বছরের জন্য বৈধ।
নির্দেশনা
RNase A স্টোরেজ সলিউশন প্রস্তুত করার জন্য এটি একটি সাধারণ পদ্ধতি।এটি দ্বারাও প্রস্তুত করা যেতে পারেপরীক্ষাগার বা রেফারেন্স সাহিত্যে প্রচলিত পদ্ধতি অনুসারে অন্যান্য পদ্ধতি (যেমন10 মিমি Tris-HCl, pH 7.5 বা Tris-NaCl দ্রবণে সরাসরি দ্রবীভূত করা)
1. RNase A স্টোরেজ সলিউশনের 10 mg/mL প্রস্তুত করতে 10 mM সোডিয়াম অ্যাসিটেট (pH 5.2) ব্যবহার করুন
2. 15 মিনিটের জন্য 100 ℃ এ গরম করা
3. ঘরের তাপমাত্রায় ঠান্ডা করুন, 1 M Tris-HCl (pH 7.4) এর 1/10 ভলিউম যোগ করুন, এর pH 7.4 এ সামঞ্জস্য করুন (এর জন্য)উদাহরণস্বরূপ, 10g/ml RNase স্টোরেজ সলিউশন 1M Tris-HCL, PH7.4 এর 500 মিলি যোগ করুন)
4. হিমায়িত স্টোরেজের জন্য -20℃-এ সাব-প্যাকেজ, যা 2 বছর পর্যন্ত স্থিতিশীল থাকতে পারে।
[নোট]: যখন নিরপেক্ষ অবস্থায় RNaseA দ্রবণ ফুটানো হয়, RNase বৃষ্টিপাত তৈরি হবে;এটি একটি কম pH এ সিদ্ধ করুন, এবং যদি বৃষ্টিপাত হয় তবে এটি লক্ষ্য করা যায়, যা প্রোটিনের অমেধ্য উপস্থিতির কারণে হতে পারে।ফুটন্ত পরে পলল পাওয়া গেলে, উচ্চ-গতির সেন্ট্রিফিউগেশন (13000rpm) দ্বারা অমেধ্য অপসারণ করা যেতে পারে, এবং তারপর জমা রাখার জন্য উপ-প্যাক করা যেতে পারে।
পণ্যের তথ্য
| সমার্থক শব্দ | রিবোনুক্লিজ I;অগ্ন্যাশয় ribonuclease;রিবোনিউক্লিজ 3'-pyrimidnooligonucleotidohydrolase;Rnase A;এন্ডোরিবোনুলসেজ আই |
| সি এ এস নং. | 9001-99-4 |
| চেহারা | সাদা লাইওফিলাইজড পাউডার |
| আণবিক ভর | ~ 13.7kDa (অ্যামিনো অ্যাসিড ক্রম) |
| পিএইচ মান | 7.6 (ক্রিয়াকলাপ পরিসীমা 6-10) |
| উপযুক্ত তাপমাত্রা | 60℃ (ক্রিয়াকলাপ পরিসীমা 15-70℃) |
| সক্রিয় এজেন্ট | Na2+.কে+ |
| ইনহিবিটার | Rnase ইনহিবিটার |
| নিষ্ক্রিয়করণ পদ্ধতি | গরম করে নিষ্ক্রিয় করা যাবে না, সেন্ট্রিফিউজ কলাম ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয় |
| উৎপত্তি | বোভাইন |
| দ্রাব্যতা | পানিতে দ্রবণীয় (10mg/ml) |
| শুকিয়ে যাওয়ায় ক্ষতি | ≤5.0% |
| এনজাইম কার্যকলাপ | ≥60 কুনিটজ ইউনিট/মিগ্রা |
| সমবৈদ্দুতিক বিন্দু | 9.6 |
মন্তব্য
আপনার নিরাপত্তা এবং স্বাস্থ্যের জন্য, অনুগ্রহ করে অপারেশনের জন্য ল্যাব কোট এবং ডিসপোজেবল গ্লাভস পরিধান করুন।
