মাল্টিপ্লেক্স qPCR প্রোব প্রিমিক্স
বিড়াল নম্বর: HCB5051A
TaqMan মাল্টিপ্লেক্স qPCR মাস্টার মিক্স (ডাই ভিত্তিক) হল 2 × রিয়েল-টাইম পরিমাণগত পিসিআর পরিবর্ধনের জন্য একটি প্রাক-সমাধান যা উচ্চ সংবেদনশীলতা এবং নির্দিষ্টতা দ্বারা চিহ্নিত, যা নীল রঙের, এবং নমুনা যোগ করার প্রভাব রয়েছে।এই পণ্যটি একটি 2× মিক্স প্রাক-মিশ্র বিকারক যা একটি একক বিক্রিয়ায় চারটি ফ্লুরোসেন্ট পরিমাণগত PCR বিক্রিয়াকে সক্ষম করে।এই পণ্যটিতে হট-স্টার্ট Taq এনজাইমের জেনেটিক্যালি পরিবর্তিত অ্যান্টিবডি পদ্ধতি রয়েছে, যা ব্যাপকভাবে পরিবর্ধন সংবেদনশীলতা এবং নির্দিষ্টতাকে উন্নত করে।একই সময়ে, এই পণ্যটি বহু-প্রতিক্রিয়া বাফারকে গভীরভাবে অপ্টিমাইজ করেছে, যা প্রতিক্রিয়ার পরিবর্ধন দক্ষতা উন্নত করতে পারে এবং কম ঘনত্বের টেমপ্লেটগুলির কার্যকর পরিবর্ধনকে প্রচার করতে পারে।এই পণ্যটি জিনোটাইপিং এবং মাল্টিপ্লেক্স পরিমাণগত বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।
স্পেসিফিকেশন
| হট স্টার্ট | অন্তর্নির্মিত গরম শুরু |
| সনাক্তকরণ পদ্ধতি | প্রাইমার-প্রোব সনাক্তকরণ |
| পিসিআর পদ্ধতি | qPCR |
| পলিমারেজ | তাক ডিএনএ পলিমারেজ |
| নমুনার ধরন | ডিএনএ |
জমা শর্ত
পণ্যটি শুকনো বরফ দিয়ে পাঠানো হয় এবং 2 বছরের জন্য -25~-15℃ এ সংরক্ষণ করা যেতে পারে।
নির্দেশনা
1. প্রতিক্রিয়াপদ্ধতি
| উপাদান | আয়তন (μL) | চূড়ান্ত ঘনত্ব |
| 2× TaqMan মাল্টিপ্লেক্স qPCR মাস্টার মিক্স | 12.5 | 1× |
| প্রাইমার মিশ্রণ (10 μmol/L) a | × | 0.1 - 0.5 μmol/L |
| প্রোব মিক্স (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| রক্স রেফারেন্স ডাই | 0.5 | 1× |
| টেমপ্লেট DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ডিডিএইচ2O | 25 পর্যন্ত | - |
মন্তব্য:প্রবল ঝাঁকুনি থেকে অতিরিক্ত বুদবুদ এড়াতে ব্যবহারের আগে পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে মিশ্রিত করুন।
কপ্রাইমারের ঘনত্ব: প্রাইমার মিক্সে একাধিক জোড়া প্রাইমার থাকে, সাধারণত প্রতিটি প্রাইমারের চূড়ান্ত ঘনত্ব 0.2 μmol/L এবং উপযুক্ত হিসাবে 0.1 এবং 0.5 μmol/L এর মধ্যেও সামঞ্জস্য করা যেতে পারে।
খ.প্রোবের ঘনত্ব: প্রোব মিক্সে বিভিন্ন ফ্লুরোসেন্স সংকেত সহ একাধিক প্রোব রয়েছে এবং প্রতিটি প্রোবের ঘনত্ব নির্দিষ্ট পরিস্থিতি অনুযায়ী 50 এবং 250 nmol/L এর মধ্যে সামঞ্জস্য করা যেতে পারে।
1.রক্স ডাই রেফারেন্স: এটি রিয়েল টাইম পিসিআর অ্যামপ্লিফিকেশন ইন্সট্রুমেন্ট যেমন অ্যাপ্লায়েড বায়োসিস্টেমগুলিতে ব্যবহৃত হয় যাতে কূপের মধ্যে উত্পন্ন ফ্লুরোসেন্স সংকেতের ত্রুটি সংশোধন করা হয়;এই পণ্যটিতে রক্স ডাই রেফারেন্স নেই।প্রয়োজন হলে Cas#10200 সুপারিশ করা হয়।
2.টেমপ্লেট পাতলা করা: qPCR অত্যন্ত সংবেদনশীল, এবং এটি ব্যবহারের জন্য টেমপ্লেটটি পাতলা করার সুপারিশ করা হয়।যদি টেমপ্লেটটি একটি cDNA স্টক সমাধান হয়, তাহলে টেমপ্লেটের পরিমাণ মোট আয়তনের 1/10 এর বেশি হওয়া উচিত নয়।
3.প্রতিক্রিয়া সিস্টেম: লক্ষ্য জিন পরিবর্ধনের কার্যকারিতা এবং পুনরাবৃত্তিযোগ্যতা নিশ্চিত করতে 25μL,30μL বা 50 μL সুপারিশ করা হয়।
4.সিস্টেম প্রস্তুতি: অনুগ্রহ করে সুপার ক্লিন বেঞ্চে প্রস্তুত করুন এবং নিউক্লিজ অবশিষ্টাংশ ছাড়া টিপস এবং প্রতিক্রিয়া টিউবগুলি ব্যবহার করুন;এটি ফিল্টার কার্তুজ সঙ্গে টিপস ব্যবহার করার সুপারিশ করা হয়.ক্রস দূষণ এবং এরোসল দূষণ এড়িয়ে চলুন।
2.প্রতিক্রিয়া প্রোগ্রাম
| সাইকেল ধাপ | টেম্প. | সময় | চক্র |
| ইনিশিয়াল-ডিনাচুরেশন | 95 ℃ | 5 মিনিট | 1 |
| বিকৃতকরণ | 95 ℃ | 15 সেকেন্ড | 45 |
| অ্যানিলিং/এক্সটেনশন | 60 ℃ | 30 সেকেন্ড |
মন্তব্য:
1.অ্যানিলিং/এক্সটেনশন: ডিজাইন করা প্রাইমার টিএম মান অনুযায়ী তাপমাত্রা এবং সময় যথাযথভাবে সামঞ্জস্য করা যেতে পারে।
2.ফ্লুরোসেন্স সংকেত অধিগ্রহণ: বিভিন্ন qPCR সনাক্তকরণ যন্ত্রের জন্য প্রয়োজনীয় ফ্লুরোসেন্স সংকেত অধিগ্রহণের সময় আলাদা, অনুগ্রহ করে সর্বনিম্ন সময়সীমা অনুযায়ী সেট করুন।কয়েকটি সাধারণ যন্ত্রের সময় নিম্নরূপ সেট করা হয়েছে:
20 সেকেন্ড: ফলিত বায়োসিস্টেম 7700, 7900HT, 7500 দ্রুত
31 সেকেন্ড: ফলিত বায়োসিস্টেম 7300
32 সেকেন্ড: ফলিত বায়োসিস্টেম 7500
মন্তব্য
আপনার স্বাস্থ্য এবং নিরাপত্তা নিশ্চিত করতে অনুগ্রহ করে প্রয়োজনীয় পিপিই, যেমন ল্যাব কোট এবং গ্লাভস পরিধান করুন!
