2×HiF Taq প্লাস মাস্টার মিক্স
বিড়াল নম্বর: HCR2014B
HIF Taq প্লাস মাস্টার মিক্স (ডাই সহ) হল একটি রেডি-টু-ব্যবহারযোগ্য 2×প্রিমিক্সড সলিউশন যাতে প্লাস HIF DNA পলিমারেজ, dNTPs এবং অপ্টিমাইজ করা বাফার রয়েছে।ঘরের তাপমাত্রায় দুটি মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি যা পলিমারেজ কার্যকলাপকে বাধা দেয় এবং 3′→5′exonuclease কার্যকলাপ সহজে এবং অত্যন্ত নির্দিষ্ট Hot Start PCR-এর জন্য মাস্টার মিক্সে যোগ করা হয়।এনজাইমটিকে একটি দীর্ঘ খণ্ড পরিবর্ধন ক্ষমতা দিতে মাস্টার মিশ্রণে এক্সটেনশন ফ্যাক্টর যোগ করা হয়, পরিবর্ধনের দৈর্ঘ্য 13 kb পর্যন্ত হতে পারে, এনজাইমের একটি 5′→3′ DNA পলিমারেজ কার্যকলাপ এবং একটি 3′→5′ রয়েছে exonuclease কার্যকলাপ, এর বিশ্বস্ততা Taq DNA পলিমারেজের 83 গুণ, যা সাধারণ DNA পলিমারেজের 9 গুণ।এটি জটিল টেমপ্লেটের পরিবর্ধনের জন্য উপযুক্ত, পরিবর্ধন পণ্য একটি ভোঁতা শেষ।
2×HIF Taq প্লাস মাস্টার মিক্স (ডাই সহ) এর দ্রুত এবং সহজ, উচ্চ সংবেদনশীলতা, শক্তিশালী নির্দিষ্টতা, ভাল স্থিতিশীলতা ইত্যাদির সুবিধা রয়েছে, প্রতিক্রিয়া সিস্টেমে শুধুমাত্র প্রাইমার এবং টেমপ্লেট যোগ করতে হবে, এবং দুটি দ্বারা প্রশস্ত করা যেতে পারে- ধাপ প্রোটোকল, পরীক্ষামূলক পদক্ষেপ সরলীকরণ এবং সময় সাশ্রয়.এই পণ্যটিতে ইলেক্ট্রোফোরসিস নির্দেশক রঞ্জক রয়েছে এবং পিসিআর পণ্যগুলি সরাসরি ইলেক্ট্রোফোরসিসের জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে।উপরন্তু, পণ্যটিতে একটি নির্দিষ্ট প্রতিরক্ষামূলক এজেন্টও রয়েছে, যাতে মাস্টার মিশ্রণটি বারবার ফ্রিজ-গলে যাওয়ার পরে স্থিতিশীল কার্যকলাপ বজায় রাখতে পারে।
জমা শর্ত
পণ্য 1 বছরের জন্য -25~-15℃ এ সংরক্ষণ করা উচিত।
স্পেসিফিকেশন
পণ্যের বিবরণ | মাস্টার মিক্স |
একাগ্রতা | 2× |
হট স্টার্ট | অন্তর্নির্মিত হট স্টার্ট |
ওভারহ্যাং | ভোঁতা |
প্রতিক্রিয়া গতি | দ্রুত |
আকার (চূড়ান্ত পণ্য) | 13kb পর্যন্ত |
পরিবহন জন্য শর্তাবলী | শুষ্ক বরফ |
পণ্যের ধরন | উচ্চ বিশ্বস্ততা পিসিআর প্রিমিক্স |
নির্দেশনা
1.পিসিআর প্রতিক্রিয়া সিস্টেম
উপাদান | আয়তন (μL) |
ডিএনএ টেমপ্লেট | উপযুক্ত |
ফরোয়ার্ড প্রাইমার (10 μmol/L) | 2.5 |
বিপরীত প্রাইমার (10 μmol/L) | 2.5 |
2×HIF Taq প্লাস মাস্টার মিক্স | 25 |
ডিডিএইচ2O | 50 থেকে |
2.বিভিন্ন টেমপ্লেটের প্রস্তাবিত ব্যবহার
টেমপ্লেটের ধরন | 1kb থেকে 10 kb পর্যন্ত টুকরাগুলিকে প্রসারিত করুন |
জিনোমিক ডিএনএ | 50ng-200 ng |
প্লাজমিড বা ভাইরাল ডিএনএ | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 μL (চূড়ান্ত PCR প্রতিক্রিয়া ভলিউমের 10% অতিক্রম করবেন না) |
3.পরিবর্ধন প্রোটোকল
1) দ্বি-পদক্ষেপ প্রোটোকল (জটিলতা টেমপ্লেট)
সাইকেল ধাপ | টেম্প | সময় | চক্র |
প্রাথমিক বিকৃতকরণ | 98℃ | 3 মিনিট | 1 |
বিকৃতকরণ | 98℃ | 10 সেকেন্ড | 30-35 |
এক্সটেনশন | 68℃ | 30 সেকেন্ড/কেবি | |
চূড়ান্ত এক্সটেনশন | 72℃ | 5 মিনিট | 1 |
2) তিন-পদক্ষেপ প্রোটোকল (নিয়মিত প্রোটোকল)
সাইকেল ধাপ | টেম্প | সময় | চক্র |
প্রাথমিক বিকৃতকরণ | 98℃ | 3 মিনিট | 1 |
বিকৃতকরণ | 98℃ | 10 সেকেন্ড | 30-35 |
অ্যানিলিং | 60℃ | 20 সেকেন্ড | |
এক্সটেনশন | 72℃ | 30 সেকেন্ড/কেবি | |
চূড়ান্ত এক্সটেনশন | 72℃ | 5 মিনিট | 1 |
3) অ্যানিলিং গ্রেডিয়েন্ট প্রোটোকল (জটিলতা টেমপ্লেট)
সাইকেল ধাপ | তাপমাত্রা | সময় | চক্র |
প্রাথমিক বিকৃতকরণ | 98℃ | 3 মিনিট | 1 |
বিকৃতকরণ | 98℃ | 10 সেকেন্ড | 15 (প্রতি চক্রে 1℃ হ্রাস) |
গ্রেডিয়েন্ট অ্যানিলিং | 70-55℃ | 20 সেকেন্ড | |
এক্সটেনশন | 72℃ | 30 সেকেন্ড/কেবি | |
বিকৃতকরণ | 98℃ | 10 সেকেন্ড |
20 |
অ্যানিলিং | 55℃ | 20 সেকেন্ড | |
এক্সটেনশন | 72℃ | 30 সেকেন্ড/কেবি | |
চূড়ান্ত এক্সটেনশন | 72℃ | 5 মিনিট | 1 |
বিভিন্ন পরিবর্ধন প্রোটোকল অধীনে বৈশিষ্ট্য
প্রোটোকোl | দুই ধাপ | তিন ধাপ | গ্রেডিয়েন্ট অ্যানিলিং |
স্পেক | দ্রুত | মধ্যম | ধীর |
বিশেষত্ব | উচ্চ | মধ্যম | উচ্চ |
পিসিআর ফলন | মধ্যম | উচ্চ | মধ্যম |
সনাক্তকরণ হার | উচ্চ | মধ্যম | উচ্চ |
মন্তব্য
আপনার স্বাস্থ্য এবং নিরাপত্তা নিশ্চিত করতে অনুগ্রহ করে প্রয়োজনীয় পিপিই, যেমন ল্যাব কোট এবং গ্লাভস পরিধান করুন!