আল্ট্রা নিউক্লিজ
UltraNuclease হল Serratia marcescens থেকে প্রাপ্ত একটি জেনেটিক্যালি ইঞ্জিনীয়ারেড এন্ডোনিউক্লেজ, যা DNA বা RNA, হয় ডাবল বা একক স্ট্র্যান্ডেড, রৈখিক বা বৃত্তাকার বিস্তৃত অবস্থার অধীনে, নিউক্লিক অ্যাসিডকে সম্পূর্ণরূপে 5'-মনোফসফেট-মনোফসফেট অলিগনসেসবেসে 5'-এ অবনমিত করতে সক্ষম। .জেনেটিক ইঞ্জিনিয়ারিং পরিবর্তনের পর, পণ্যটিকে গাঁজন, প্রকাশ এবং শুদ্ধ করা হয়েছিল Escherichia coli (E. coli), যা কোষের সুপারন্যাট্যান্ট এবং সেল লাইসেটের বৈজ্ঞানিক গবেষণার সান্দ্রতা হ্রাস করে, কিন্তু প্রোটিনের বিশুদ্ধকরণ দক্ষতা এবং কার্যকরী গবেষণাকেও উন্নত করে।এটি জিন থেরাপি, ভাইরাস পরিশোধন, ভ্যাকসিন উত্পাদন, প্রোটিন এবং পলিস্যাকারাইড ফার্মাসিউটিক্যাল শিল্পে একটি হোস্ট অবশিষ্টাংশ নিউক্লিক অ্যাসিড অপসারণ বিকারক হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে।
পণ্যের বৈশিষ্ট্য
সি এ এস নং. | 9025-65-4 |
ইসি নং। | |
আণবিক ভর | 30kDa |
সমবৈদ্দুতিক বিন্দু | ৬.৮৫ |
প্রোটিন বিশুদ্ধতা | ≥99% (SDS-PAGE & SEC-HPLC) |
নির্দিষ্ট কার্যকলাপ | ≥1।1×106U/mg |
সর্বোত্তম তাপমাত্রা | 37°C |
সর্বোত্তম পিএইচ | ৮.০ |
প্রোটিজ অ্যাক্টিভিটি | নেতিবাচক |
বায়োবর্ডেন | ~10CFU/100,000U |
অবশিষ্ট হোস্ট-সেল প্রোটিন | ≤10ppm |
ভারী ধাতু | ≤10ppm |
ব্যাকটেরিয়াল এন্ডোটক্সিন | ~0.25EU/1000U |
স্টোরেজ বাফার | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2 , 20mM NaCl, 50% গ্লিসারল |
জমা শর্ত
≤0°C পরিবহন;-25~-15°C স্টোরেজ,2 বছরের মেয়াদ (হিমায়িত-গলানো এড়িয়ে চলুন)।
ইউনিট সংজ্ঞা
△A260-এর শোষণ মানকে 37 °C এ 30 মিনিটের মধ্যে 1.0 দ্বারা পরিবর্তন করতে ব্যবহৃত এনজাইমের পরিমাণ, pH 8.0, অলিগোনিউক্লিওটাইডে কেটে হজম করা 37μg সালমন শুক্রাণুর ডিএনএর সমতুল্য, একটি সক্রিয় ইউনিট (U) হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল।
মান নিয়ন্ত্রণ
অবশিষ্ট হোস্ট-সেল প্রোটিন: ELISA কিট
•প্রোটিজ অবশিষ্টাংশ: 250KU/mL UltraNuclease 60মিনিটের জন্য সাবস্ট্রেটের সাথে প্রতিক্রিয়া করেছে, কোন কার্যকলাপ সনাক্ত করা যায়নি।
•ব্যাকটেরিয়াল এন্ডোটক্সিন: LAL-টেস্ট, ফার্মাকোপিয়া অফ দ্য পিপলস রিপাবলিক অফ চায়না ভলিউম 4 (2020 সংস্করণ) জেল সীমা পরীক্ষা পদ্ধতি।সাধারণ নিয়ম (1143)।
•বায়োবর্ডেন: পিপলস রিপাবলিক অফ চায়নার ফার্মাকোপিয়া ভলিউম 4 (2020 সংস্করণ)- সাধারণ
বন্ধ্যাত্ব পরীক্ষার নিয়ম (1101), PRC ন্যাশনাল স্ট্যান্ডার্ড, GB 4789.2-2016।
•ভারী ধাতু:ICP-AES, HJ776-2015।
অপারেশন
যখন SDS ঘনত্ব 0.1% বা EDTA এর বেশি ছিল তখন UltraNuclease কার্যকলাপ উল্লেখযোগ্যভাবে বাধাপ্রাপ্ত হয়েছিল
ঘনত্ব ছিল 1 মিমি-এর বেশি। সারফ্যাক্ট্যান্ট ট্রাইটন এক্স-100, টুইন 20 এবং টুইন 80 নিউক্লিয়াজে কোনও প্রভাব ফেলেনি
বৈশিষ্ট্য যখন ঘনত্ব 1.5% এর নিচে ছিল।
অপারেশন | সর্বোত্তম অপারেশন | বৈধ অপারেশন |
তাপমাত্রা | 37℃ | 0-45℃ |
pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
Mg2+ | 1-2 মিমি | 1- 15 মিমি |
ডিটিটি | 0- 100 মিমি | >100 মিমি |
2-Mercaptoethanol | 0- 100 মিমি | >100 মিমি |
একক ধাতু আয়ন (Na+, K+ ইত্যাদি) | 0-20 মিমি | 0-200 মিমি |
PO43- | 0- 10 মিমি | 0- 100 মিমি |
ব্যবহার এবং ডোজ
• ভ্যাকসিন পণ্য থেকে এক্সোজেনাস নিউক্লিক অ্যাসিড সরান, অবশিষ্ট নিউক্লিক অ্যাসিডের বিষাক্ততার ঝুঁকি হ্রাস করুন এবং পণ্যের নিরাপত্তা উন্নত করুন।
• নিউক্লিক অ্যাসিড দ্বারা সৃষ্ট ফিড তরলের সান্দ্রতা হ্রাস করুন, প্রক্রিয়াকরণের সময় কমিয়ে দিন এবং প্রোটিন ফলন বাড়ান।
• নিউক্লিক অ্যাসিড অপসারণ করুন যা আবৃত কণা (ভাইরাস, ইনক্লুশন বডি, ইত্যাদি), যা সহায়ক
কণার মুক্তি এবং পরিশোধনের জন্য।
পরীক্ষামূলক প্রকার | প্রোটিন উৎপাদন | ভাইরাস, ভ্যাকসিন | সেল ড্রাগস |
সেল সংখ্যা | 1 গ্রাম সেল ভেজা ওজন (10ml বাফার দিয়ে পুনরায় সাসপেন্ড করা হয়েছে) | 1L গাঁজন তরল supernatant | 1L সংস্কৃতি |
ন্যূনতম ডোজ | 250U | 100U | 100U |
প্রস্তাবিত ডোজ | 2500U | 25000U | 5000U |
• নিউক্লিজ চিকিত্সা কলাম ক্রোমাটোগ্রাফি, ইলেক্ট্রোফোরেসিস এবং ব্লটিং বিশ্লেষণের জন্য নমুনার রেজোলিউশন এবং পুনরুদ্ধারের উন্নতি করতে পারে।
• জিন থেরাপিতে, শুদ্ধ অ্যাডেনো-সম্পর্কিত ভাইরাস পেতে নিউক্লিক অ্যাসিড অপসারণ করা হয়।