রনেস এ
Ribonuclease A(RNaseA) হল একটি একক-স্ট্রেন্ডেড পলিপেপটাইড যা প্রায় 13.7 kDa এর আণবিক ওজন সহ 4টি ডিসালফাইড বন্ড ধারণ করে।RNase Ais একটি endoribonuclease যা বিশেষভাবে C এবং U অবশিষ্টাংশে একক-স্ট্রেন্ডেড RNA ক্ষয় করে।বিশেষত, ক্লিভেজ একটি নিউক্লিওটাইডের 5'-রাইবোজ এবং পার্শ্ববর্তী পাইরিমিডিন নিউক্লিওটাইডের 3'-রাইবোসে ফসফেট গ্রুপের দ্বারা গঠিত ফসফোডিস্টার বন্ধনকে স্বীকৃতি দেয়, যাতে 2,3'-সাইক্লিক ফসফেটগুলি হাইড্রোলাইজডিং-এর সাথে 3'-রাইবোস তৈরি করে। 'নিউক্লিওসাইড ফসফেটস (যেমন, pG-pG-pC-pA-pG pG-pG-pCp এবং A-PG তৈরি করতে RNase A দ্বারা ক্লিভ করা হয়)।RNase A একক-স্ট্র্যান্ডেড RNA ক্লিভ করার জন্য সবচেয়ে সক্রিয়।প্রস্তাবিত কাজের ঘনত্ব হল 1- 100 μG/mL, বিভিন্ন প্রতিক্রিয়া সিস্টেমের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।কম লবণের ঘনত্ব (0-100 mM NaCl) একক-স্ট্রেন্ডেড RNA, ডাবল-স্ট্র্যান্ডেড RNA, এবং RNA-DNA সংকরকরণের মাধ্যমে গঠিত RNA চেইন কাটতে ব্যবহার করা যেতে পারে।
যাইহোক, উচ্চ লবণের ঘনত্বে (≥0.3 M), RNase A শুধুমাত্র বিশেষভাবে একক-স্ট্র্যান্ডেড RNA ক্লিভ করে।
প্লাজমিড ডিএনএ বা জিনোমিক ডিএনএ তৈরির সময় আরএনএ অপসারণ করতে RNase A সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত হয়।প্রস্তুতি প্রক্রিয়া চলাকালীন DNase সক্রিয় কিনা তা সহজেই প্রতিক্রিয়াকে প্রভাবিত করতে পারে।একটি জল স্নান মধ্যে ফুটন্ত ঐতিহ্যগত পদ্ধতি DNase কার্যকলাপ নিষ্ক্রিয় করতে ব্যবহার করা যেতে পারে.এই পণ্যটিতে DNase এবং প্রোটিজ নেই এবং ব্যবহারের আগে তাপ চিকিত্সার প্রয়োজন হয় না।উপরন্তু, এই পণ্যটি RNase সুরক্ষা বিশ্লেষণ এবং RNA সিকোয়েন্স বিশ্লেষণের মতো আণবিক জীববিজ্ঞান পরীক্ষায়ও ব্যবহার করা যেতে পারে।
জমা শর্ত
পণ্যটি 2 বছরের জন্য -25℃~- 15℃ এ সংরক্ষণ করা উচিত।
স্পেসিফিকেশন
| চেহারা | পাউডার |
| পরিমাণ | 100mg/1g |
| পণ্যের ধরন | RNase A |
নির্দেশনা
RNase A স্টোরেজ সলিউশন প্রস্তুত করার জন্য এটি একটি সাধারণ পদ্ধতি।এটিও প্রস্তুত করা যেতে পারেল্যাবরেটরি বা রেফারেন্স সাহিত্যের ঐতিহ্যগত পদ্ধতি অনুসারে অন্যান্য পদ্ধতি দ্বারা (যেমন10 মিমি Tris-HCl, pH 7.5 বা Tris-NaCl দ্রবণে সরাসরি দ্রবীভূত করা)
1. RNase A স্টোরেজ দ্রবণ 10 mg/mL প্রস্তুত করতে 10 mM সোডিয়াম অ্যাসিটেট (pH 5.2) ব্যবহার করুন।
2. 15 মিনিটের জন্য 100 ℃ এ গরম করা।
3. ঘরের তাপমাত্রায় ঠান্ডা করুন, 1 M Tris-HCl (pH 7.4) এর 1/10 ভলিউম যোগ করুন, এর pH 7.4 এ সামঞ্জস্য করুন (এর জন্য)উদাহরণস্বরূপ, 10 mg/mL RNase স্টোরেজ সলিউশন 1 M Tris-HCl, pH7.4 এর 500 mL যোগ করুন)।
4. হিমায়িত স্টোরেজের জন্য -20℃-এ সাব-প্যাকেজ, যা 2 বছর পর্যন্ত স্থিতিশীল হতে পারে।
[মন্তব্য]:
নিরপেক্ষ অবস্থায় RNaseA দ্রবণ ফুটানোর সময়, RNase বৃষ্টিপাত তৈরি হবে;এটি একটি কম pH এ সিদ্ধ করুন, এবং যদি বৃষ্টিপাত হয় তবে এটি লক্ষ্য করা যায়, যা প্রোটিনের অমেধ্য উপস্থিতির কারণে হতে পারে।ফুটন্ত পরে পলল পাওয়া গেলে, উচ্চ-গতির সেন্ট্রিফিউগেশন (13000rpm) দ্বারা অমেধ্য অপসারণ করা যেতে পারে, এবং তারপর জমা রাখার জন্য উপ-প্যাক করা যেতে পারে।
মন্তব্য
আপনার স্বাস্থ্য এবং নিরাপত্তা নিশ্চিত করতে অনুগ্রহ করে প্রয়োজনীয় PPE, যেমন ল্যাব কোট এবং গ্লাভস পরিধান করুন।
